1.在加样的时候出现失误或者试剂的质量出现问题,从而造成反应体系不完整。
2.在反应体系里存在聚合酶YZ剂或者聚合酶失活。
3.PCR基因扩增仪的的温度没有得到精确的控制。
4.模板DNA发生降解。
5.引物或反应温度设计不合理。
6.靶片段有过高的GC含量或者扩增对象的长度过长。
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