PCR纯化产物为什么能直接连接，什么情况下直接连接？求高手指教。

PCR纯化产物直接连接通常分为两种情况，
一是TA连接，如phusion，高保真的taq，PCR后会有一个A末端，和T载体的T末端互补相连。
另一是平末端连接，如pfu，PCR后是平末端，可以和blunt II vector这一类的载体直接相连，但顺序是随机的，可能是正的，也可能是反的。

楼主莫不是问TA克隆，常规的Taq酶，会在产物的3‘端额外加一个A，这时就可以利用这个A，直接连接到T载体上。所谓T载体，一般是将载体以EcoRV酶切，然后在末端加一个T，与PCR产物上的A互补配对，经连接酶连接就可以用于转化了。

PCR利用了DNA的热变性原理，在温度上升到90&(代表摄氏度符号)以上时，双链DNA解聚为单链；温度下降到50&左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;温度上升到72&左右，溶液中的四中脱氧核苷酸(A.T.C.G)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。你所提到的什么情况下直接连接，是在有引物何聚合酶的情况下。

PCR扩增产物两端都有酶切位点的情况下，由于互补配对就可以直接连接。