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什么叫透析法纯化蛋白质?为什么要用缓冲液?

day这样吧 2011-07-05
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yuzmzz
透析是利用半透性膜将待纯化蛋白质包裹,沉浸在缓冲液中;
由于缓冲液浓度低于膜内部的浓度,因此在半透膜上会发生物质交换;
但蛋白质不能通过半透膜,只有盐离子等小分子物质可以通过;
因此,待纯化蛋白质中的盐杂质就通过半透膜交换到外面了。
使用缓冲液有两个原因,一是不用缓冲液蛋白质可能会变性;二是因为在以后的使用过程中都会使用缓冲液,因此缓冲液对于蛋白质本身来说不是杂质。
4 0 2016-12-01 0条评论 回复
知訫莮孩
透析法:是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物质不能通过半透膜的性质,达到分离的方法。用透析法纯化蛋白质就是,将盐类离子等小分子滤过,从而达到蛋白质的纯化。
缓冲液的作用是调节Z适PH值,使得溶液的环境适合蛋白质,防止其在操作过程中聚集沉淀或是变性。
14 0 2011-07-07 0条评论 回复
墨尐颜爬
用透析袋纯化蛋白,透析袋中放蛋白液,外面放相应的低浓度的溶液,如果是用于浓缩的话外面的溶液可以是40%蔗糖液,如果是纯化的一般是去小分子物质例如盐类物质,不断更换外面的溶液直到出去全部小分子物质。
用缓冲液其实是提供一个离子环境,和一个相依的蛋白质适宜的PH值,使得蛋白质在操作过程中由于离子浓度的变化聚集沉淀,或者是PH的变化,导致蛋白质变性。
11 0 2011-07-06 0条评论 回复
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