核酸提取过程介质纯化方法和不同类型核酸的分离

核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究等多种领域得到广泛地应用。

介质纯化方法

目前为止，介质纯化方法受到越来越多的重视。对于大规模核酸抽提非常适合是其Zda特点。并且纯度有很高的稳定性（尽管和PC纯化方法相比较，纯度不一定更高），是由于人为操作因素对其的影响小。样品过量是其致命弱点。介质可以分为柱式的和颗粒状两大类。柱式的，就是在下面通的柱子里预先装填介质；颗粒状的介质的纯化操作与经典的醇沉淀没有很大的差别，均是通过数次的加液-倒液过程，干燥后，溶解就能够使纯化好的核酸获得。尽管柱式纯化的操作也是有加液-倒液过程，然而由于加入的液体通过离心后会进入另外一个离心管中，与含有核酸的柱子完全分离，因此，能够更加省力的操作（残留液体或者倒掉核酸无需操心）和更加彻底的洗涤。不过，在所有纯化方法中，介质纯化方法具有Zgao的成本。

不同类型核酸的分离

制备两种类型核酸过程中。经常发生有少量DNA混杂在RNA制品中或者有少量RNA混杂在DNA制品中的情况。因为DNA和RNA有着很相似的结构和性质，并且有着十分大的分子量，因此核酸纯化工作中比较复杂和繁琐的步骤就是两类核酸的分离。以下为从DNA中除去RNA常用的方法：

活性炭吸附

在每毫升含有0.5～1mgDNA溶液中按1/15～1/20体积加入处理好的活性炭。在0～4摄氏度下搅拌1小时，以31000×g离心1小时，将RNA除去后能够达到94%DNA回收率。在RNA制品中将DNA去除，比较常用和有效的方法是苯酚水溶液抽提。在不存在阴离子化合物，通过等体积90%苯酚水溶液对RNA反复抽提，能够将大部分DNA除去。

钙盐分步沉淀

将1/10体积10%的氯化钙溶液加入到核酸溶液中，使DNA与RNA均成为钙盐后，再利用DNA钙盐在2/10体积乙醇中使得沉淀形成析出。RNA钙盐不会使沉淀形成而分离。

核糖核酸酶

相对比较有效的方法就是通过核糖核酸酶对RNA选择地破坏。然而常常有极微量的脱氧核糖核酸酶包含在使用的核糖核酸酶中，必须通过加热处理事先除去，之后在37℃孵育纯净的核糖核酸酶与样品溶液几分钟，就使破坏RNA的目的达到。