核酸提取仪CTAB法

CTAB法是提取DNA主要的方法，其他方法还有生物方式：酶法，化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法，物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。

分类

细胞器DNA、细胞核DNA。

单链环状、双链线性、双链环状。

组织DNA、细胞悬液DNA、、病毒DNA、质粒DNA、真核生物DNA、细菌DNA。

提取原则

1.应当将如蛋白质、多糖和脂类分子等其他生物大分子的污染应降低到Zdi程度。

2.应当尽可能去除如RNA的其他核酸分子。

3.使核酸一级结构的完整性得以保证。

4.不应当有对酶有YZ作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子存在于核酸样品中。

提取方法

1.表面活性剂快速制备法

使用Triton X-100A或NP40表面活性剂对细胞破碎，然后使用蛋白酶K或酚将蛋白去除，使用乙醇沉淀或透析。

2.加热法快速制备

温度96℃-100℃加热5min，之后离心后取上清，能够在PCR反应时使用。

3.碱变性快速制备

首先使用NaOH作用20min，再将HCI加入中和，离心后取上清，含有少量DNA。

4.玻璃棒缠绕法

使用盐酸胍对细胞进行裂解，在乙醇上铺上裂解物，然后在界面使用带钩或U型玻璃棒轻搅，在玻棒绕DNA沉淀液，使得80kbDNA生成。

5.异丙醇沉淀法

6.酚抽提法

首先使用蛋酶K、SDS对细胞进行破碎，化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb。

7.甲酰胺解聚法

和上面方法一样先将细胞破碎，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得200kb左右DNA。