DNA提取常见问题、原因及解决方法

核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在环境微生物检测、食品安全检测、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究以及畜牧业等多种领域得到广泛地应用。下面就让小编带你了解一下DNA提取常见问题。

DNA提取常见问题

DNA提取量少

原因一：沉淀不完全

解决方法：低温沉淀，使沉淀时间延长，将辅助物加入，对沉淀起到促进作用。

原因二：洗涤时DNA丢失

解决方法：在洗涤时，洗涤液Z好使用枪头将其吸出，不要倾倒。

原因三：实验材料不好或者量少

解决方法：材料尽可能选用新鲜的。

原因四：破壁或者裂解不充分

解决方法：动植物要匀浆研磨充分，G+菌、酵母菌裂解之前先采用酶或者机械方式破壁，高温裂解时，淫荡适当延长时间。

DNA降解

原因一：提取过程操作剧烈

解决方法：细胞裂解之后的后续操作应当尽可能轻柔。

原因二：外源核酸酶污染

解决方法：使用无菌水配置所有试剂，对耗材高温灭菌。

原因三：反复冻融

在缓冲液中分装保存DNA，从而使反复冻融得以避免。

原因四：材料不新鲜或者反复冻融

解决方法：尽可能采用新鲜材料，为了防止反复冻融，应将材料低温保存。

原因五：对内源核酸酶的活性没有很好YZ

解决方法：在对内源核酸酶含量丰富的材料DNA进行提取时，可以对裂解液中螯合剂的含量进行增加。

DNA样品不纯

原因一：DNA在溶解之前，有酒精残留，酒精会对后续酶解反应起到YZ作用

解决方法：对DNA重新沉淀，充分挥发酒精。

原因二：有金属离子残留在DNA中

解决方法：将70％乙醇洗涤次数增加2-3次

原因三：有蛋白、多糖以及多酚等杂质存在于DNA中

解决方法：对DNA重新纯化，将蛋白、多糖以及多酚等杂质除去。