发布:
北京迪科马科技有限公司时间:
2019-12-31行业:
制药/化妆品 兽用药
净化:ProElut PXC 60 mg/3 mL (Cat.#68203)
1、提取 将5 g 动物组织、15 mL 乙酸乙酯、3 mL 10% 碳酸钠溶液置于50 mL 离心管中,10000 rpm 下均质2 min。6000 rpm 下离心2 min,将上清液转入另一离心管中。用15 mL 乙酸乙酯重复提取残渣,合并乙酸乙酯。向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L 的盐酸溶液,涡旋混合1 min,然后在6000 rpm 下离心1 min,收集下层水相。重复萃取一次,合并下层水相,用2.5 mol/L 氢氧化钠溶液调节pH 至5.2。
2、净化
a 活化: 依次向ProElut PXC 60 mg/3 mL (Cat.#68203) 中加入3 mL 甲醇、3 mL 水和3 mL30 mmol/L 盐酸,流出液弃去;
b 上样: 将提取液加入柱中*,流出液弃去;
c 淋洗: 依次用3 mL 水、3 mL 甲醇淋洗,淋洗液弃去,并将小柱抽干;
d 洗脱: 用5 mL 4% 氨水甲醇洗脱,收集洗脱液于具塞玻璃试管中,50 ºC 下氮气吹干
注: 由于样品量大于柱管体积,应分次上样,或在PXC 柱上加12 mL 储液管(Cat.#4810),适配器 (Cat.#4803)
3、衍生化 向上述盛有残渣的具塞玻璃试管中加入100 μL 甲苯和100 μL 双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA),涡旋振荡20 s,密封玻璃塞,置于80 ºC 恒温烘箱中加热1 小时,冷却后加入300 μL 甲苯,作为试样溶液,供GC/GC-MS 分析。
进样口温度:220 oC 进样方式:不分流 进样量:1 μL 程序升温:70 oC (0.6min), 以25 oC/min 升温至200 oC (min),以25 oC/min 升温至280 oC (5min)载气:He (>99.999%) 流速:0.9 mL/min 质谱条件 接口温度:280 oC 溶剂延迟:8 min EI 温度:230 oC 四极杆温度:160 oC离子监测:定性离子:86、243、262、277 ;定量离子:86
适用于动物肌肉和肝脏中盐酸克仑特罗、沙丁胺醇等4 种β -激动剂药物的测定
1. 克伦特罗;2. 沙丁胺醇;3. 西马特罗;4. 莱克多巴胺