发布:
北京迪科马科技有限公司时间:
2019-12-31行业:
制药/化妆品 兽用药
样品提取
(1)称取5 g均质样品于50 mL离心管中,加入20 mLMcllvaine缓冲液
(2)涡旋混合2 min,4000 rpm下离心5min,收集上清液;
(3)将下层残留物依次用20mL,10 mLMcllvaine缓冲液重复提取两次,合并 三次提取液,并定容至50 mL;
(4)将提取液用快速滤纸过滤,收集滤液,取10 mL滤液,作为上样液,待净化。
该步骤仅供参考,使用者可根据实验室现有过滤设备进行调整,例如用砂芯漏斗
SPE柱净化——ProElut PLS 60mg/3mL(Cat.#68003)
活化:依次加入3 mL甲醇,3 mL水,流出液弃去。
上样:将上样液加入柱中,流出液弃去。
淋洗:PLS依次用3mL水,3mL5%的甲醇水溶液淋洗,流出液弃去,然 后将PLS柱抽干。
洗脱:3 mL甲醇洗脱,收集洗脱液。
重新溶解:在40℃下用减压蒸馏将洗脱液浓缩至近干,然后用流动相重新 定容至1mL。
由于上清液的量大于柱管体积,应分次上样,或者在PLS柱上加20mL储液管(Cat.#4811)适配器(Cat.#4803).
色谱柱:Spursil C18 150×4.6mm ID 5μm(Cat.#82001) 流速:1.0 mL/min 检测器:UV 365 nm 柱温:30℃ 进样量:20 μL 流动相A:0.01 mol/L草酸水溶液 流动相B:乙腈:甲醇(1+1)!
适用于动物组织中土霉素、四环素、金霉素和QL霉素的检测。
1 土霉素、 2 四环素、 3金霉素 3 QL霉素