spr传感化学技术

表面等离子共振技术，简称SPR，是从20世纪90年代发展起来的一种新技术，对在生物传感芯片（biosensor chip）上配位体与分析物之间的相互作用情况的检测是SPR应用原理。在各个领域得到广泛地应用。

亲和力捕获表面组氨酸标签蛋白

(HisCap和HisHiCap芯片)

HisCap芯片附着蛋白质的方式是采用了NTA-Ni技术。在这种技术中,由表面附着的NTA-Ni复合物和感兴趣蛋白质的组氨酸的侧链咪唑共同协作。这种技术十分有效的前提即是蛋白质的组氨酸需要充足。6个组氨酸为典型的组氨酸标标记，然而3个也行。

HisCap芯片为His-tagged蛋白的直接固定提供了一个Z便利的手段，也对任何带有足够数量的组氨酸残基的蛋白十分适用。

聚组氨酸标签蛋白的固定因HisCap芯片而可逆和稳定，HisCap芯片也能够保证更加简单地进行表面等离子共振（SPR）实验。

连有固定蛋白的基线十分稳定，能够做动力学分析实验。

HisCap芯片优势：

1.如果条件温和，能够再生芯片。比如咪唑以及EDTA。

2.HisCap芯片能够重复使用。

3.在实验室的重组蛋白工作中，His-tagging是一个长期建立的标准技术。

4.利用HisCap芯片可以使捕获的His-tagged蛋白产生的基线稳定。

胺基偶联固定

（COOH1和COOH2芯片）

因为胺基基团非常普遍，因此对于绝大部分的生物分子来说，通过胺基偶联固定配体均适用。到目前为止，只要使用该方法随机固定配体，一般都可以获得高质量的结果。所以直接固定特定位点一般没有必要。

使用NHS和EDC含水混合物对羧基活化，使得胺基活性脂产生为Z常使用用的方法。该流程具有如下优点：

1.生物分子不需要在恶劣的条件中暴露。

2.固定的条件非常容易控制，能够避免和表面过度交叉连锁。

3.用于制备化学试剂。冻存数月

4.不需要标记，也不需要衍生作用，就能够对绝大多数生物分子进行固定。

5.有大量稳定的共价键产生，从而避免了配体从表面滤掉。

6.在广泛的pH值中，十分有效果。