组织研磨-QuEChERS-GX液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中磺胺类药物残留以及基质效应的研究

    食品工业科技2020年第10期分析检测部分，发表了兰州市食品药品检验所张虹艳、邱国玉等老师的研究文章，此项研究使用SPEX高通量组织研磨仪建立了新的磺胺类药物残留的分析检测方法。

   概述

    建立起组织研磨－QuEChERS－GX液相色谱－串联质谱法测定动物源食品中磺胺类药物残留的分析检测方法。样品用 EDTA 缓冲液溶解后，通过组织研磨仪高速处理样品，以乙腈提取目标化合物，经 Bond QuEChERS 提取、QuEChERS EMR－Lipid 净化，使用三重四极杆液质联用仪进行分析。C18色谱柱分离，0.1% 甲酸－乙腈梯度洗脱，外标法定量。结果表明，10 种磺胺在一定浓度范围内线性关系良好，决定系数( R2) 均大于 0.99，目标化合物检出限( S/N = 3) 为0.2 μg / kg，定量限( S /N = 10) 为 0.5 μg / kg。方法平均回收率为 89.4% ～111.0% ，相对标准偏差( n = 6) 为 0.8% ～4.9% ，该方法操作简单，回收率高，适用于动物源食品中磺胺类药物残留的测定。低质量浓度的磺胺类药物在猪肉、牛奶、鸡蛋中均存在明显基质效应，采用基质匹配标准曲线校正法可以对基质效应产生的影响进行补偿与消除。

    此实验以猪肉、牛奶、鸡蛋为研究对象，采用组织研磨仪－QuEChERS－三重四极杆液质联用仪，对动物源性食品中磺胺类兽药残留进行研究。组织研磨仪采用上下垂直高速振荡模式。本文作者还讨论研究了不同条件下，组织研磨仪对磺胺类药物提取效果的影响，并探索猪肉、鸡蛋、牛奶三种动物源性食品的基质效应，为优化兽药残留检测方法、提高兽药残留检测技术提供数据支持和理论依据。

   研磨条件优化

    传统的涡旋振荡提取方式，动能低，样品均匀性无法得到保证，导致实验结果重现性不好。为了使得样品研磨更加均匀、充分，样品重复性好，保证样品的重现性、有效性、可比性，组织研磨仪可设置研磨时间、研磨速率，保证每次研磨条件的一致性。分别设置不同研磨速率以及研磨时间，对比10 种磺胺类药物的回收率，确定ZY研磨速率以及研磨时间。以猪肉为实验对象，添加混合标准溶液100 μL( 见1.2.1) ， 10 种磺胺类药物的添加量为50 μg /kg。

    设定研磨速率为1000 r /min，研磨时间分别为0.5、1、1.5、2、3 min，其余步骤按1.2.2 进行样品前处理，每个样品平行测定3 次，外标法定量。结果见图2，随着研磨从0.5 min 逐渐升至3 min，10 种磺胺类药物的平均回收率呈现逐渐增大再回落的趋势，研磨时间为2 min 时，10 种磺胺类药物的平均回收率ZG，研磨时间为3 min 时， 10 种磺胺类药物的平均回收率略有降低。因为动物组织随着研磨时间增长，细胞破碎越充分，细胞内蛋白质等物质大量释放，不利于磺胺类药物的提取。

图2 不同研磨时间对10 种磺胺类药物回收率的影响

    设定研磨时间为2 min，研磨速率分别为500、800、1000、1200、1400、1600 r /min ( ZD速率1750 r /min) ，其余步骤按1.2.2 进行样品前处理，每个样品平行测定3 次，外标法定量。猪肉在不同研磨速率下均可研磨呈肉糜状，猪肉提取液随着研磨速率升高，组织破碎越细腻均匀，颜色越浅，结果见图3。研磨速率从500 r /min 提高至1600 r /min 时，10 种磺胺类药物回收率呈现整体缓慢增大之后保持平稳的趋势。研磨速率提高至1000 r /min 时， 10 种磺胺类药物的平均回收率ZG，研磨速率从1000 r /min提高至1600 r /min，回收率维持在稳定水平，说明当研磨速率提升至1000 r /min 时，猪肉组织已研磨均匀，猪肉组织达到平衡状态，因此选择1000 r /min 作为Z适宜研磨速，如图3 所示。

图3 不同研磨速率对10 种磺胺类药物回收率的影响

    感谢张虹艳等老师们对垂直高速振荡模式组织研磨的认可，美国SPEX SamplePrep 公司1954年成立至今，一直致力于向市场提供Z专业、Z实用的前处理仪器，是冷冻研磨、垂直振荡高通量动植物组织研磨、∞式三维高能球磨等前处理方式的发明者。SPEX高通量组织研磨仪采用上下垂直高速振荡模式，可以促进细胞快速破碎、细胞裂解、组织匀浆，使得样品研磨更加均匀、充分，样品重复性好，样品之间没有交叉污染，同时节省了时间和人力成本的消耗，是一种高通量高速率GX的样品前处理技术。欲下载文章全文，请与我们联系。

高通量组织研磨仪

超高通量：一次可处理576个样品或16个50mL样品瓶

超GX率：垂直振荡ZL技术，1-2min完成困难样品研磨、均质

高均一性：批量处理样品，程序化处理机制，均一性、重复性更好

更人性化：可调角度彩色触摸显示屏，可编辑、调用、存储500种方法

适用性广：程序可调，更多研磨瓶、研磨介质可供选择，WM契合不同样品研磨、混匀需求

安全可靠：双重门锁，研磨过程更安全；设置保密程序，限制查看特定方法

低温研磨：专业Kryo-Tech低温组件及可调循环程序，维持研磨全过程低温，适合温度敏感型样品