奶和奶粉中磺胺类药物的测定

样品前处理：

1、提取

将15 mL 奶( 或3 g 奶粉+15 mL 水) 与15 mL 乙腈加入塑料离心管，涡旋混合2 min，6000 rpm下离心5 min ；

取20 mL 上清液于另一离心管，加15 mL 正己烷，涡旋混合2 min，6000 rpm 下离心2 min，弃去正己烷，加入15 mL 正己烷重新操作一次；

向下层清液中加入15 mL 乙酸乙酯，涡旋混合2 min，6000 rpm 下离心2 min，收集上层清液；

15 mL 乙酸乙酯重复提取一次，合并上清液。

将乙酸乙酯提取液在30 oC 下减压蒸馏至近干，用10 mL 2% 磷酸溶液分两次溶解残渣，待净化。

2、净化 ProElut PXC 200 mg/6 mL (Cat.#68212)

a 活化： 6 mL 甲醇活化、6mL 水平衡；

b 上样：将待净化液( 相当于10 mL 牛奶或2 g 奶粉) 加入小柱，流出液弃去；

c 淋洗：依次用6 mL 水、6 mL 甲醇淋洗小柱，流出液弃去；

d 洗脱： 6 mL 5% 氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；

e 重新溶解：30 oC 下将洗脱液减压蒸馏至近干，用1 mL 流动相溶解残渣，微孔滤膜过滤后供HPLC 分析

注：e 步骤是供参考的，使用者可根据自己使用的分析仪器进行调整。

色谱条件：

流速：1 mL/min

进样量：20 μL

检测器：UV 270 nm

柱温：35 oC

流动相：梯度，A 乙腈 B 2% 乙酸水溶液

梯度设置 T 0 30 38 39 45 A 12 25 25 12 12 B 88 75 75 88 88

注：本方法中，目标化合物是由HPLC 测定的，但这并不表明其他仪器不适合。当使用者采用其他方式进行检测时，同样可以采用本方法进行样品前处理。其中T是时间。

图谱：

1. 磺胺吡啶；2. 磺胺甲基嘧啶；3. 磺胺二甲基嘧啶；4. 磺胺甲氧哒嗪；5. 磺胺甲恶唑；6. 磺胺异恶唑；7. 磺胺喹恶唑；8. 磺胺间二甲氧基嘧啶