红毛五加叶水提液对羟自由基清除率的测定

色谱柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm, 5μm (Cat#:99603)

流动相:乙腈－水(65:35,V/V)

流速:0.8mL/min

进样量:20μL

检测器:紫外检测器,365nm

摘要:[目的]测定红毛五加叶水提液对羟自由基的清除率并评价其抗氧化活性.[方法]利用Fenton反应产生羟自由基,用二甲亚砜(DMSO)捕获羟自由基并与之反应生成甲醛,甲醛经2,4-二硝基苯肼衍生成相应的苯腙,通过HPLC检测加或不加样品时该苯腙的峰面积的变化,从而计算红毛五加叶水提液对羟自由基的清除率.色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm5,μm),流动相为乙腈-水(65∶35,V/V),流速为0.8 mL/min,检测波长为365 nm.[结果]Fenton反应体系为2.0 mmol/L Fe2++107.7 mmol/L H2O2+225.2 mmol/L DMSO;在该反应体系中红毛五加叶水提液清除羟自由基的IC50为0.67 mg/ml(即每1 ml含药材量为0.67 mg);红毛五加叶总皂苷是清除羟自由基的活性成分.[结论]红毛五加叶水提液能够清除Fenton反应产生的羟自由基,具有较强的抗氧化活性.

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