鸡蛋中土霉素，四环素，金霉素，QL霉素的测定

样品前处理：

样品提取

(1) 称取1g均质样品于50mL离心管中，加入5mLMcllvaine缓冲液和2mL；

(2) 涡旋混合2 min，4000 rpm下离心10 min 收集上清液

(3) 下层残留物依次用5 mL和2.5 mLMcllvaine缓冲液重复提取两次，合并三次提取液，作为上样液，待净化。 *Mcllvaine缓冲液(pH4.0)：称取磷酸氢二钠、柠檬酸乙二胺四乙酸二钠盐用水溶解后稀释并定容至1000mL

净化-ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.# 68004)

a 活化：依次加入6 mL 甲醇和6 mL 水，流出液弃去；

b 上样：将上样液加入小柱中*，流出液弃去；

c 淋洗：依次用6 mL 水和6 mL 10% 的甲醇水溶液淋洗，流出液弃去，将小柱抽干；

d 洗脱： 10 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液

e 重新溶解：40 oC 下将洗脱液减压蒸馏至近干，用流动相溶解并定容至1 mL 后HPLC 分析。

* 由于样品量超过柱容量，应分次上样或在SPE 柱上安装20 mL 储液管 (Cat.#4811)，适配器 (Cat.#4803)

色谱条件：

色谱柱：Spursil C18 150×4.6mm ID 5μm (Cat. #82001)

流速：1.0 mL/min

检测器：UV 365 nm

柱温：30

进样量：20 μL

流动相A：0.01 mol/L草酸水溶液流动相B：乙腈+甲醇（1+1）

图谱：

1 土霉素 2 四环素 3 金霉素 4 QL霉素