蜂蜜中四环素类药物的测定

净化:ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004) 

1、提取

(1)称取5 克样品，加入25mLMcllvaine缓冲液

(2)充分振荡，并涡旋混合，直至样品完全溶解，待净化。 注：Mcllvaine 缓冲液(pH 4) ：称取磷酸氢二钠(Na2HPO4?12H2O)27.6g、柠檬酸(C6H8O7?H2O) 12.9 g、乙二胺四乙酸二钠盐37.2 g，用水溶解后稀释并定容至1000 mL。

2、净化 ProElut PLS 150mg/6mL（Cat.#68004）

(1)活 化：依次加入5mL甲醇，5mL水，流出液弃去。

(2)上 样：将溶解好的样品溶液加入柱中，流出液弃去。

(3)淋 洗：依次用5mL水，5mL5%的甲醇水溶液淋洗，流出液弃去，然后将PLS柱抽干。

(4)洗 脱：5mL甲醇洗脱，流出液收集。 (5)重新溶解：*将洗脱液在40℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。 注：由于上清液的量大于柱管体积，应分次上样，或在PLS 柱上加20 mL 储液管(Cat.#4811)，适配器(Cat.#4803)

色谱柱： Spursil C18 150×4.6mm ID，5μm(Cat.#82001)

流 速： 1.0 mL/min

检测器： UV 365 nm

柱 温： 30 ℃

进样量： 20 μL

流动相A： 0.01mol/L草酸水溶液 流动相B： 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 时间0min-10.0min 流动相B从30%到50%；10.0min~10.5min 流动相B从50%到30%；10.5min~20min流动相B为30%。

适用于蜂蜜中四环素类药物的分析。

1. 土霉素；2. 四环素；3. 金霉素