在对培养的大肠杆菌进行活菌计数时，发现琼脂表面有乳白色微偏暗的直径约4~5mm的菌落，琼脂底部与培养皿接触的面上有浅色较浅的白色直径约3mm的菌落，而琼脂内的菌落却只有约1mm直径，请问琼脂内的菌落是大肠杆菌菌落吗？会不会是杂菌？如果是大肠杆菌，为什么... 在对培养的大肠杆菌进行活菌计数时，发现琼脂表面有乳白色微偏暗的直径约4~5mm的菌落，琼脂底部与培养皿接触的面上有浅色较浅的白色直径约3mm的菌落，而琼脂内的菌落却只有约1mm直径，请问琼脂内的菌落是大肠杆菌菌落吗？会不会是杂菌？如果是大肠杆菌，为什么一个平皿内的相同菌会形态不一样？
注：1.试验环境为无菌环境，操作均严格按照无菌操作进行。
2.培养的过程：冻干菌株——复苏——营养肉汤培养（37摄氏度摇床，约18小时）——营养肉汁琼脂培养基平皿画线培养（37摄氏度隔水恒温培养箱，约24小时）——（挑取单个菌落）营养肉汁琼脂斜面培养基培养（37摄氏度隔水恒温培养箱，约24小时）——活菌计数实验（培养：37摄氏度隔水恒温培养箱，约48小时）
从你的培养过程看；其中一个环节不知道你做了没有？培养基配制好后倒平板之前是否进行了灭菌？假如这步你没有做那么出现杂菌就是必然的，其琼脂内有杂菌也就是这个原因造成的。
琼脂底部与培养皿接触的面上有浅色较浅的白色直径约3mm的菌落。。这个问题是不是因为你的培养皿灭菌不彻底造成的。
你说的同一平板内同一菌种的形态却不一致，这个很可能是接种过后你的培养基被污染了，所以还是混了杂菌。还有一个原因就是你挑去的单菌落并不是纯的单菌落，它自身就含杂菌。
我的回答只能作为参考，希望对你有用。也希望你下次试验能成功。
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刘博胤 
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