目的基因连入表达载体后用不用先转入DH5a扩增、酶切鉴定然后再转入BL21?

Z好先转入DH5-alpha扩增，这样可以提高目的基因的数量与纯度，经酶切确认后，可获得足够多的DNA转入BL21。当然，如果你对你的目的基因有自信（如用PCR从另外的质粒上扩增而来，且条带清洗专一），也可以直接转入BL21做表达，这样可以节约大约1.5-2天的时间。另外帮你找了一下，我们实验室现在没有细胞的protocol。

转入DH5a之后，提纯质粒，酶切可以做初步的鉴定，Z好再做测序，从而能确定载体序列没有发生变化，然后再转到BL21做诱导表达。