仪器社区

DNA提取需要注意什么?

xu_5210 2009-10-14
评论
全部评论
R_Azarias
这个自己叙述不太好说,我做过基因工程的实验。看了看这个,觉得还行,就给你复制下来了
1.固定剂对DNA的影响固定剂的类型直接影响提取DNA的质量。
2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组织反应至今尚未被完全理解,虽然理论上讲室温下与DNA几乎不发生的,但已发现碱基与组蛋白之间的甲基交联。这介导的甲基化直接影响DNA提取的效率。
3.固定温度等其他因素对DNA的影响核酸与固定剂的反应由反应成分、浓度、酸碱度以及温度等因素的调节,其中温度效应显得特别重要。
4.组织处理过程对DNA的影响我们发现,从常规组织处理的蜡块中提取的DNA,其大部分分子量晨100bp-10000bp之间,主要分布于100-1500bp,仅约1/3的组织所提取DNA>20kb。这除与固定剂、固定时间等因素有关以外,可能的原因还有:①组织从外科切除到固定之间的时间长短下一。当组织未固定或固定不充分时,核酸酶可自由作用;②不同肿瘤中核酸酶的水平不一,其在固定前或固定后均不发挥作用;③蜡块贮存的地间长短不一。虽然本所获得的DNA分子量大。可能蜡块中仍存在导致DNA降解的因素。组织的浸蜡和包埋温度过高或时间过长,均可导致DNA弯性,而产生单链DNA片段。单链DNA不能被限制性内切酶所消化,可导致电泳时泳动速率变慢
20 0 2016-12-02 0条评论 回复
一明妈妈
你好!
你是想做乙肝的病毒数检查的话,是不需要准备什么的,血液的检查方式,到医院抽血检查就可以了!
1 0 2009-10-15 0条评论 回复
xinxmv0119
对于碱裂解法,就这么多:
1.加入溶液1后要剧烈震荡,将菌体完全悬浮于溶液中,不可有块状菌体。
2.加入溶液2后混匀要轻柔,千万不可剧烈,否则会有基因组RNA污染。
3.从加入溶液2后开始要尽可能的快,特别是加入溶液2到加入溶液3之间这段时间。
4 0 2009-10-15 0条评论 回复
追天揽月123
要注意的多了。每一步都要注意
5 0 2009-10-15 0条评论 回复
面瘫是班头啊
1.盛放鸡血细胞液的容器,Z好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中Z好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失。
2.充分搅拌鸡血细胞液DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
3.玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。
4不能用猪血替代鸡血,哺乳动物的成熟红细胞无细胞核,不能提取DNA
5 0 2009-10-15 0条评论 回复
您可能感兴趣的社区主题
加载中...
发布 评论