大肠杆菌是原核生物没有内质网,不能对蛋白质进行修饰变成糖蛋白。大肠杆菌可以作为受体细胞,是因为它拥有游离于拟核之外的可表达环状DNA——质粒.所以引入DNA片段要相对容易一些.而且大肠杆菌繁殖快,易培养,比较适宜工业生产。
大肠杆菌有核糖体,就足以表达它的DNA了。蛋白质的合成,不是必须经过内质网和高尔基体大量生产的原因,是因为菌量大、代谢快、增值快。
胰岛素是分泌蛋白,其合成、加工、分类、包装、运输等与内质网和高尔基体有关。而大肠杆菌是原核生物,没有内质网和高尔基体,也就无法对胰岛素原进行加工、分类、包装和运输。能做为基因工程的受体细胞合成人的胰岛素的是酵母菌,解释说大肠杆菌不具备其他的细胞器无法加工。
有些蛋白质肽链上有共价结合的糖链,这些糖链是在内质网和高尔基复合体上加工完成的,内质网和高尔基复合体存在于真核细胞中,大肠杆菌不存在这两种细胞器,因此,在大肠杆菌中生产这种糖蛋白是不可能的。
正常胰岛素是由胰岛素原酶切后,成两条链。
将人胰岛素基因A、B链的人工合成基因分别组合到E.coli的不同质粒上,然后再移至菌体内,着种重组质粒在E.coli细胞内进行正常的复制和表达,从而使带有A、B链基因的工程菌株分别产生人胰岛素A、B链,然后再用人工的方法,在体外通过二硫键使这2条链连接成有活性的人胰岛素。