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如何从粪便当中分离纯化出大肠杆菌

vfrxwb888 2014-06-15
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asling1231211
操作步骤
1 检样稀释
a. 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样Z好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。
b. 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
c. 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。
d. 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管。 2 乳糖发酵试验
将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃ 温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。
3 分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。
4 证实试验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
5 报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。
2 0 2016-11-28 0条评论 回复
wojiushiyuli
拉屎出来后用手搅拌均匀撒上葱花即可
6 0 2014-06-16 0条评论 回复
玖玥0929
用乳糖胆盐发酵培养基分离
7 0 2014-06-16 0条评论 回复
85752838号
可以用稀释涂平板法。因为粪便中含量Z多的就是大肠杆菌。你只要稀释的倍数合适,长出的单菌落,可以说,都是大肠杆菌。培养温度为37,培养基可以用LB培养基。
13 0 2014-06-17 0条评论 回复
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