我看好多文献上面讲在活性多肽的提取中,采用水提醇沉的方法,就是说用70%的乙醇去沉淀蛋白质或多肽,但是乙醇等有机溶剂会使蛋白质类和多肽类失活啊,为什么他们还在文献里面说是活性物质的提取?难道乙醇不会使他们失活吗?谢谢。
乙醇沉淀蛋白实际上是乙醇在水中的溶解度比蛋白质大,高比例的乙醇和蛋白质争夺水分子破坏了蛋白质表面的水膜,使得蛋白质沉淀下来。实质上此时的蛋白质并未彻底变性,仅仅是失水而已。在重新获得水后还是可以复性的,就和冻干成干粉的蛋白重新溶解到水中是一样的。但这个也不是的,主要是看目标蛋白或者多肽的特性,有些蛋白对有机试剂非常敏感,沉淀后不一定能够正常的复性。此外一点是,蛋白质和活性多肽提取没有一个方法能够保证所提取的所有类型的蛋白都能保证活性。所以,关键一点是根据目标蛋白的性质来选择不同的分离手段。