转化大肠杆菌之前用了PCR纯化，会不会有影响

如果你指的是PCR产物，在酶切和连接之前做了纯化，这往往是必要的（如果条带单一，纯度好，酶切和连接体系成熟，也可以不纯化）；
如果是在连接试验后，再用试剂盒纯化一次，这会对实验有很大的影响：
1、纯化过程本身会有较大损失，起始量约少，相对损失就越大；
2. pcr的纯化试剂盒往往是针对小片段（100-5k bp以内）DNA的，对于质粒，其回收效率可能进一步下降；
所以，这样极有可能导致转化效率大幅下降，但如果你的连接产物本身较易转化，还是有可能成功的。

个人见解，仅供参考，祝愉快！