常用六种耐热DNA聚合酶比较

深度解析

常用TaqDNAPolymerase六种耐热DNA聚合酶比较
TaqDNAPolymerase
延伸速度快的耐热DNA聚合酶，延伸速度为1-2kb/分钟。可以很好的扩增6kb以下的DNA片段。用于普通PCR扩增，其PCR产物含3'端单个dA，能进行TA克隆。
Taq-plusDNAPolymerase
集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高，保真度比Taq好。能有效的扩增10kb以下的片段。用于一些对保真度要求高和模板结构复杂(如GC含量高、有二级结构等)的PCR扩增。普通PCR扩增，TA克隆。
PfuDNAPolymerase
DNA聚合时的延伸速度为0.5-1kb/min，该酶具有独特的3‘→5’外切核酸酶活性，能修正错配碱基，从而保证DNA扩增的高保真度。适用于高保真扩增长度为3kb以下的片段。保真度要求较高，片段比较短，如基因表达、点突变、基因筛选等。PCR产物为平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。
HotstartTaqDNAPolymerase
经过化学修饰的耐热DNA聚合酶。常温下酶活性被封闭，要在94-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应，避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增，提高了反应的灵敏度和特异性。基因组扩增、DNA序列测定、MultiplexPCR、TA克隆
LongTaqDNAPolymerase
具有3’－5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶，它不但扩增效率高而且错配率低，对于简单模板可扩增长达40kb的模板，对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。TA克隆、构建基因图谱、测序以及分子遗传学研究等。
GCTaqDNAPolymerase
用于扩增具有高级结构和高GC含量的DNA模板。扩增长片段DNA(>10Kb)。保真度是普通TaqDNA聚合酶的6倍左右。TA克隆
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2004-08-16