转化细胞检测中的应用

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转化细胞检测中的应用
HCV是引起输血后肝炎的主要致病因子，因其在血中的含量极低，仅为HBV的1%，其免疫学标志只有抗-HCV一项，且至今病毒分离尚未成功，所以HCV的检测较HBV困难的多，因此，PCR技术在HCV的检测出显得格外重要，其意义主要表现在：
1、抗-HCV可作为HCV感染诊断的指标。由于个体间免疫功能的差异，部分患者出现抗-HCV较晚，免疫功能低下者和经免疫YZZL者甚至可能不产生抗-HCV；因此HCV-RNA是HCV感染的确诊标志。据报道，在患者发病30-60天和6-30个ELISA抗-HCV的检出率分别为45%和67%，说明ELISA检出抗-HCV有相当高的漏检率。
2、在“窗口期"没有抗-HCV产生，但可检测出RNA。
3、HCV-RNA定量可指导用药，为LX观察及预后判断提供客观指标。血清HCV拷贝高对干扰素不敏感，低敏感，据报道，HCV<100pg/ml组：11/30转阴HCV>100pg/ml组：1/30转阴。
HCV-RNA持续维持高水平状态可能预后不佳。
检测要点：
1.仔细阅读说明书确定试剂盒在有效期内。
2.按说明书确定所有试剂齐全，以及所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等。
3.标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存。
4.按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂。
5.选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。
6.一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的Elsia操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
转化细胞HGFmiRNA人牙龈成纤维细胞微小RNA1g
HPLRmiRNA人牙周膜成纤维细胞微小RNA1g
HEEpiCmiRNA人食道上皮细胞微小RNA1g
HESMCmiRNA人食道平滑肌细胞微小RNA1g
HIMECmiRNA人肠微血管内皮细胞微小RNA1g
HISMCmiRNA人肠平滑肌细胞微小RNA1g
HCSMCmiRNA人结肠平滑肌细胞微小RNA1g
HPMECmiRNA人肺微血管内皮细胞微小RNA1g
HPAECmiRNA人肺动脉内皮细胞微小RNA1g
HPASMCmiRNA人肺动脉内皮细胞微小RNA1g
HPAFmiRNA人肺动脉成纤维细胞微小RNA1g
HPAEpiCmiRNA人肺泡上皮细胞微小RNA1g
HBEpiCmiRNA人支气管上皮细胞微小RNA1g
HTEpiCmiRNA人气管上皮细胞微小RNA1g
HSAEpiCmiRNA人小气道上皮细胞微小RNA1g
HPFmiRNA人肺成纤维细胞微小RNA1g
HBSMCmiRNA人支气管平滑肌细胞微小RNA1g
HTSMCmiRNA人气管平滑肌细胞微小RNA1g
HSkMCmiRNA人骨骼肌细胞微小RNA1g
HSkMSCmiRNA人骨骼肌卫星细胞微小RNA1g
HSkMMmiRNA人骨骼肌成肌细胞微小RNA1g
HRGECmiRNA人肾小球内皮细胞微小RNA1g
HRPTEpiCmiRNA人肾近曲小管上皮细胞微小RNA1g
HRCEpiCmiRNA人肾皮质上皮细胞微小RNA1g
HREpiCmiRNA人肾上皮细胞微小RNA1g
HRMCmiRNA人肾系膜细胞微小RNA1g
HBdSMCmiRNA人膀胱平滑肌细胞微小RNA1g转化细胞

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2005-02-23