现如今,酶联免疫检测方式有多种,您可以根据自己的偏好来选择。我公司的科研检测试剂盒产品Zxin一批上市了,如有购买需要可及时同我们销售人员取得联系,您的信任就是我们不断进取的Zda动力。
双抗体夹心法
1.将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2.加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
3.加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
4.加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
双位点一步法
在一步法测定中,应注意钩状效应,类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。
间接法测抗体
1.将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2.加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
3.加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体间接记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。
4.加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。
本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
竞争法
1.将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。
2.待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。上海恒远生物说明,如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达Z充分的量。洗涤。
3.加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原Z多,故颜色Z深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。
捕获法
1.将抗人IgM抗体连接在固相载体上,形成固相抗人IgM。洗涤。
2.加入稀释的血清标本:保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。
3.加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。
4.加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。
5.加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,是为阳性反应。
以上方法中您Z偏好哪一种呢?一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物,抗体上结合有相应的酶,而反应体系中添加有相应的底物。ELISA的结果检测还包括放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。
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