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蛋白质纯化方法-沉淀法

蛋白质纯化系统

沉淀法

沉淀法又叫做溶解度法。通过各种物质的结构差异性来使溶液的某些性质得到改变,进而改变有效成分的溶解度,为其纯化生命大分子物质的基本原理。


1、蛋白质沉淀剂

蛋白质沉淀剂只会对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。


2、聚乙二醇沉淀作用

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物能够使得蛋白质发生沉淀作用。


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3、选择性沉淀法

按照在不同物理化学因子作用下,各种蛋白质稳定性不同的特点,使用适当的选择性沉淀法,就能够使杂蛋白变性沉淀,而在溶液中仍然保留欲分离的有效成分,从而使得纯化有效成分的目的达到。


4、盐析法

在稀盐溶液中,随着盐浓度的,蛋白质的溶解度也会上升,然而当盐浓度到一定数值时,降低了水活度,从而造成蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,逐渐破坏了水化膜,Z终导致蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。


5、有机溶剂沉淀法

有机溶剂可以使得蛋白质溶解度降低,有如下两点原因:

(1)和水相比,有机溶剂的介电常数更加的小,从而减小了溶剂的极性。

(2)起到脱水的作用,和盐溶液相同。


2005-08-02
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