怎么确保细胞在培养箱内健康生长

细胞培养箱是提供稳定的温度（37°C）、稳定的CO2水平（5%）、恒定的酸碱度（pH值：7.2-7.4）、较高的相对饱和湿度（95%），来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。细胞培养时，细胞可能会出现死亡的现象，那么就让小编带你了解一下细胞培养时应该注意哪些问题，以确保细胞在培养箱内健康的成长。

1.保证实验材料无菌

由于细胞培养箱内温暖潮湿，是真菌生长的良好环境，所以必须定期的对细胞培养箱进行清洁。除此之外，应该先用酒精擦拭干净培养瓶，移液管和其他相关的物品后，再将它们放入到超净台，防止污染。

2.处理培养物时要小心

温度不断的波动或者剧烈的摇晃都会严重影响细胞的生长。所以培养箱Z好要温度恒定，不晃动，放在离电动仪器较远的地方。除此之外，一次处理多个细胞系可能会对细胞的表型和基因型产生影响，所以应该尽量避免。为了确定细胞系的身份，还需要定期完成STR图谱的分析。

3.正确解冻细胞

虽然解冻的操作步骤很简单，还是需要恰当的操作，防止细胞受到伤害。细胞不能够长时间暴露在高温的条件下。所以为了防止对DMSO直接造成伤害，应该先把冻存管放在37度的水浴中两分钟，然后再用条件培养基稀释。

4.使用对数生长期的细胞

细胞的培养过程总共分为停滞期，对数期和平台期三个阶段，这三个阶段分别代表了低细胞生长，高细胞生长和无细胞生长。细胞越有活力，细胞就越健康，分裂也就越快，在对数期以百分之七十到八十的汇合度存在。

5.传代前，不能让细胞完全汇合

贴壁细胞所占培养瓶表面积的百分比被称为汇合度。完全汇合表面贴壁细胞百分bai的占据了培养瓶的表面。如果细胞呈现完全汇合状态，那么就表面细胞不能够生长。所以要使用有活力的细胞。

6.选择良好的培养基

在细胞培养过程中，培养基影响着产品的质量，产量和成本。为了更好的实验结果，需要对每一种培养物进行培养基定制。

7.配置干粉培养基时要注意水的质量

比起干粉培养，液体培养常常会获得质量更高的结果。这或许与水的质量有关。

8.利用细胞代谢特性优化培养基

对使用过的培养基进行分析，对于鉴定必要成分（包括氨基酸和维生素）的代谢速率很有帮助。

9.避免细胞过度消化

为了实现贴壁细胞的传代，需要通过胰蛋白酶消化使细胞和容器结合的蛋白质。但是，细胞不能在胰蛋白酶中太长时间，否则胰蛋白酶会消化细胞表面的蛋白。

10.培养基不能持续使用抗生素

细胞培养物不能长时间在抗生素中，否则会出现对抗生素有着天然耐药性的菌株出现，潜在的污染可能会被掩盖在这种现象里。