过滤对一种 IgG2 亚型 EGFR 单抗中不溶性微粒的影响

单抗SBP是目前国内生物制品中申报临床试验Z多的品种，药学研究证实与已上市RBP具有“质量相似性”是其作为SBP开发的先决条件，如果 SBP的产品质量明显区别于原研产品，可以作为药学研究存在重大缺陷，并作为审评不予通过的理由；反之，如果质量高度相似，那么可以根据相似的程度决定着后续非临床、临床研究是否可以简化。本文以某IgG2亚型的EGFR单抗为例，使用FlowCam微流数字成像技术分析不溶性微粒这一关键质量属性，发现其SBP候选药与 RBP存在较大差异，蛋白聚集倾向明显，说明研发和质控水平有待提高，为国内相关企业在单抗SBP 生产过程、制剂配方筛选、包材选用、储运及临床 应用等方面的研究提供思路与方法，以保证产 品质量、安全性和有效性，Z终惠及广大病患。

目的： 探讨过滤操作对一种免疫球蛋白 G2（immunoglobin G2，IgG2）亚型表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）单克隆抗体（单抗）生物类似药（similar biotherapeutic product，SBP）候选药中不溶性微粒的影响。

 方法：利用微流数字成像（microflow digital imaging，MDI）技术对某厂家生产的 IgG2 亚型 EGFR 单抗 SBP 候选药与其原研药（reference biotherapeuticproduct，RBP）中不同粒径的不溶性微粒进行比较；采用 0.22 μm 的滤器对 EGFR 单抗 SBP 候选药进行过滤，并采用 MDI 法立即对不同粒径和性质的不溶性微粒进行检测和分析；再将过滤后的 EGFR 单抗SBP 候选药在室温静置 2 h，并采用 MDI 法对不同粒径和性质的不溶性微粒进行检测和分析。

 结果：某IgG2 亚型 EGFR 单抗 SBP 候选药中不同粒径的不溶性微粒数量明显高于 RBP；用 0.22 μm 的滤器过滤后，EGFR 单抗 SBP 候选药中的不溶性微粒数由 8.51×10 5 粒·mL -1 降为 1.52×10 4 粒·mL -1 ，且主要成分蛋白聚体、气泡和纤维均明显减少；室温静置 2 h 后，其中的不溶性微粒数由 1.52×10 4 粒·mL -1 增加至 3.23×10 4 粒·mL -1 ，且增加的微粒主要为蛋白聚体。结论：与原研药相比，该 EGFR 单抗 SBP 候选药蛋白聚体水平较高，过滤后有明显改善，但随着放置时间延长，蛋白聚体含量又有明显增加。这提示我们需加强研发，以提高 SBP 候选药的产品质量、安全性和有效性。

关键词：  单克隆抗体；过滤；不溶性微粒；蛋白聚体；微流数字成像技术

表 1 M D I法的稳定性和准确性

图 1 抗 EG FR 单抗 SBP 候选药与其 R BP 不溶性微粒检测结果（ — x+s，n=3）

图 2 抗 EG FR 单抗 SBP 候选药过滤前后不同粒径、不同成分不溶性微粒的比较（

—

x+s，n=3）

图 3 抗 EG FR 单抗 SBP 候选药过滤后及滤后 2h 不同粒径、不同成分不溶性微粒的比较（ — x+s，n=3

 讨论

单抗SBP是目前国内生物制品中申报临床试验Z多的品种，药学研究证实与已上市RBP具有“质量相似性”是其作为SBP开发的先决条件，如果SBP的产品质量明显区别于原研产品，可以作为药学研究存在重大缺陷，并作为审评不予通过的理由；反之，如果质量高度相似，那么可以根据相似的程度决定着后续非临床、临床研究是否可以简化。本文以某IgG2亚型的EGFR单抗为例，分析不溶性微粒这一关键质量属性，发现其SBP候选药与RBP存在较大差异，蛋白聚集倾向明显，说明研发和质控水平有待提高，为国内相关企业在单抗SBP生产过程、制剂配方筛选、包材选用、储运及临床应用等方面的研究提供思路与方法 [12-14] ，以保证产品质量、安全性和有效性，Z终惠及广大病患。