玩转UNICORN｜从入门到精通：Miscellaneous Phase使用全指南

2024-09-0675

有没有小伙伴在探索UNICORN时总是会发现一些奇怪的功能不会用？不要紧，玩转UNICORN系列为您揭秘那些你懂的你不懂的UNICORN功能！

在Method Editor窗口方法编程时，Phase Library中有一个叫做Miscellaneous的Phase，可以拖拽至方法流程中的任意位置。Miscellaneous内含New Chromatogram、Set Mark、Delay Volume、Message、Pause Timer几个选项，执行切图、标注、延迟一定体积、信息提示和暂停等功能，来辅助编辑方法以贴合实际的实验过程。

图1：Miscellaneous包含的命令

? New Chromatography ?

New Chromatography命令可以在实验运行过程中对整个实验曲线图谱进行分割并命名。例如在亲和层析实验中，如遇样品体积很大，则在整个实验图谱中Sample Application上样部分占比会非常大，而关键的Elution洗脱部分可能会被挤压到占比很小的区间，而利用New Chromatography命令可以将整个曲线图谱进行分割，例如编辑方法时可以在平衡Equilibration、进样Sample Application、洗脱Elution、清洗Column CIP每一个Phase之前都可以插入一个命名的New Chromatography的Miscellaneous（图2）。

图2：New Chromatography切割图谱

方法运行结束后，在Evaluation窗口打开结果，可以看到每一步都有自己独立的曲线图谱窗口，方便单独查看（图3），或者并排一起查看（图4）。

图3：单独查看每个图谱

图4：并排查看所有图谱

? Set Mark ?

Set Mark用于插入标记注释，并且标注会被写入Run log记录中。例如在实验过程中可以对缓冲液和样品进行Set Mark标注，尤其是在大量筛选洗脱缓冲液时，可以在Elution之前插入Set Mark标注缓冲液配方，并在Scouting中将每个缓冲液入口与标注相互关联（图5）。

图5：Set Mark对缓冲液进行标注

? Delay Volume ?

Delay Volume命令可以将实验延迟一定体积后再执行后续的步骤。例如标签蛋白的柱上酶切纯化实验，利用loop环将蛋白酶inject注入层析中，由于进样阀到层析柱顶端之间有一定的管线体积，例如经过计算为0.15 mL，可以增加一个含Delay Volume的Miscellaneous在进样之后，将残留在进样阀到层析柱之间管线内的蛋白酶完全流入层析柱中，再进行后续的酶切孵育（图6）。

图6：Delay Volume让管道残留样品流入层析柱

? Message ?

Message命令执行时会在软件界面中出现弹窗提示信息、并可以设置弹窗后无期限的暂停实验。

例如当不便在开始运行实验程序之初就将样品环推入loop中，而是希望在层析柱平衡完毕后暂停实验，手动推入样品至loop然后再执行后续的实验步骤，那么可以在Equilibration和Sample Application之间插入一个含Message的Miscellaneous，其中设置Message信息如Please manual load sample to loop，并勾上Pause after Message（图7）。