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怎样成为一个研究生物大分子技术的生物学家

秦文风秦文风秦 2017-04-20
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Snoworlove
怎样成为一个研究生物大分子技术的生物学家
生物大分子的制备通常可按以下步骤进行:
①确定要制备的生物大分子的目的和要求,是进行科研、开发还是要发现新的物质.
②建立相应的可靠的分析测定方法.主要有两类:即生物学和物理、化学的测定方法.生物学的测定法主要有酶的各种测活方法、蛋白质含量的各种测定法、免疫化 学方法、放射性同位素示踪法等;物理、化学方法主要有比色法、气相色谱和液相色谱法、光谱法、电泳法、以及核磁共振等.
③通过文献调研和预备性实验,掌握生物大分子目的产物的物理化学性质.
④生物材料的破碎和预处理.
⑤分离纯化方案的选择和探索,这是Z困难的过程.制备生物大分子的分离纯化方法多种多样,如盐析、有机溶剂沉淀、层析和结晶、电泳、离心、超滤等.目前纯 化蛋白质等生物大分子的关键技术是电泳、层析和高速与超速离心.在实际工作中往往要综合运用多种方法,才能制备出高纯度的生物大分子.
⑥生物大分子制备物的均一性(即纯度)的鉴定.蛋白质和酶制成品纯度的鉴定Z常用的方法是:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳,如能再用GX液相 色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)进行联合鉴定则更为理想,必要时再做N-末端氨基酸残基的分析鉴定.核酸的纯度鉴定通常采用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯 酰胺凝胶电泳,但Z方便的还是紫外吸收法,即测定样品在pH 7.0时260nm与280nm的吸光度(A260和A280),从A260/A280的比值即可判断核酸样品的纯度.
4 0 2017-04-21 0条评论 回复
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