我“克隆出来的酶基因片段送样测序的部分”加上我原来“扩增此序列所用的引物上的一部分”才是全基因，要把这个全基因拿来做原核表达，行不行，怎么用这段全基因？应该不能用这段克隆序列设计表达引物吧，用全基因设计表达引物的话，在原来扩增引物上的那部分... 我“克隆出来的酶基因片段送样测序的部分”加上我原来“扩增此序列所用的引物上的一部分”才是全基因，要把这个全基因拿来做原核表达，行不行，怎么用这段全基因？应该不能用这段克隆序列设计表达引物吧，用全基因设计表达引物的话，在原来扩增引物上的那部分序列怎么办啊？
明白一部分意思，告诉你怎么做吧，你现在测序的这个菌株已经包括了全长基因。下一步是要把这个全长基因连接到表达载体上。你需要设计另一对引物，即在起始密码子和终止密码子后引入表达载体上的酶切位点即可，这样PCR出来的产物再连接T载体，测序，酶切，回收目的片段，连接在表达载体上就可以了。
其实你开始设计引物的时候把酶切位点加进去就可以了，不用费这二遍事了。
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xuanjiu890227 
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