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目的基因的扩增曲线,都怎么看
异世界的那谁
2016-12-27
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George926798
你好,扩增曲线可以粗略地判断扩增效率。SYBR Green的双delta Ct法要求目的基因和内参的扩增效率基本一致。如果不一致,需要对公式进行修正,部分qPCR仪的配套软件可以做到,直接输入每对引物的扩增效率。但无论如何,保证高扩增效率是实验成功的关键。如果扩增效率一致,不同Ct的曲线显示出来就基本是平行的位移,其倾斜程度基本一致。而如下图一样,一条比较“陡”,另一条比较“平”,那么意味着扩增效率不一致。有可能是引物效率不一,或者个别样品、反应孔存在YZPCR的污染等。
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2016-12-28
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