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在PCR扩增基因时为什么要用限制性内切酶

萌爪医生 2010-07-09
我和一同学都在做基因多态性的实验,我俩选的基因不同,查阅了文献,我做PCR扩增时,不需要限制性内切酶,并且我已做出和文献上一样的基因条带;而他的实验文献上报道需要限制性内切酶,我不知为什么?
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敏姐是个好人0
真核生物基因外显子中有不能表达为蛋白质的片段.故用限制性内切酶去掉多余部分.
14 0 2010-07-10 0条评论 回复
jinjijinn
只有识别了才可以扩增撒
15 0 2010-07-10 0条评论 回复
稳稳雯雯98
应该是酶切PCR产物吧,因为做基因多态性,可能你的基因在不同生态型里面序列是有变化,那么这些变化怎么检测出来,Z的方法就是测序,能准确的知道那些位置上的碱基序列不一样,第二个就是先把这一段基因序列PCR扩增放大量,然后用个酶进行酶切PCR产物,看看不同模板的酶切带型是不是一样的,有的类似于限制酶切片段多态性(RFLP)
5 0 2010-07-11 0条评论 回复
af05522
pcr扩增本身不需要使用限制性内切酶。只是扩增完了之后,需要把基因连接到质粒载体时才需要限制性内切酶,制造粘性末端或者平末端。在通常的基因克隆实验设计中,限制性内切酶只是切除两端少量的几个碱基,所以你pcr扩增后的条带不使用限制性内切酶与使用的区别是看不出来的。
9 0 2010-07-11 0条评论 回复
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