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bl21细胞破碎液为什么有蛋白酶活性

tizijie615 2017-03-05
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紫丁香的孤单
一、高速组织捣碎 :材料配稀糊状液放置于筒内约一/三体积盖紧筒盖调速器先拨至慢处关逐步加速至所需速度适用于物内脏组织、植物肉质种 等二、玻璃匀浆器匀浆 :先剪碎组织置于管再套入研杆研磨移即细胞研碎细胞破碎程度比高速组织捣碎机高适用于量少物脏器组织三、超声波处理 :用定功率超声波处理细胞悬液使细胞ZG剧震荡破裂适用于微物材料用肠杆菌制备各种酶选用50-一00毫克菌体/毫升浓度 一KG至一0KG频率处理一0-一5钟缺点处理程产量热应采取相应降温措施超声波敏核酸应慎用四、反复冻融: 细胞-二0度冰冻室温融解反复几由于细胞内冰粒形剩余细胞液盐浓度引起溶胀使细胞结构破碎5、化处理: 些物细胞例肿瘤细胞采用十二烷基磺酸钠(SDS)、氧胆酸钠等细胞膜破坏细菌细胞壁较厚采用溶菌酶处理效更论用哪种破碎组织细胞都使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放溶液使物降解导致物质量减少加入二异丙基氟磷酸 (DFP)YZ或减慢自溶作用;加入碘乙酸YZ些性需要疏基蛋白水解酶性加入苯化物(PMSF)能清除蛋白水解酥 力全部通选择pH、温度或离强度等使些条件都要适合于目物质提
5 0 2017-03-06 0条评论 回复
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