在纯化蛋白时，镍离子有什么作用？

镍柱纯化his-tag protein是常用的方法。原理大概就是his上有咪唑杂环，这个环可以带有很多电子，可以与含正电的金属离子发生亲和反应。由于蛋白质是两性的，所以当pH变化时，带电也会发生变化，所以可以控制pH进行亲和/洗脱，从而纯化目的蛋白。