微生物限度检查概述及方法
diyi部分 药品微生物限度检查原理；
一 微生物学基本原理
（一）、 微生物的概念和类别；
所谓微生物（microorgamisms）是一群个体微小结构简单肉眼不能直接看到，必须借助显微镜以及其它手段才能辨别微小生物。
1、结构类型
按微生物细胞结构和组成不同可分
原核细胞型微生物：代表（细菌） 真核细胞型微生物：代表（真菌） 非细胞型微生物：代表（病毒）
2、营养类型
根据微生物的不同营养要求，可分为自养型和异养型两类，又以所利用能源的来源不同，分为化能营养型和光能营养型。
药品中所污染的微生物，从营养型角度看，他大多数异养型，且以腐生性和兼性寄生性化能异养型为主，容易用人工培养繁殖，是药品进行无菌及限度检查的Z基本原理。
3、 影响微生物生长繁殖的因素
1）物理因素：温度、 湿度、 渗逶压、 辐射
2）化学因素：营养物质、酸碱度、 氧、 有毒物质：
其影响微生物生长的机制主要有
a使菌体蛋白变性或沉淀
b干扰微生物酶系统各的影响其代谢
c损伤微生物细胞膜，使内容物逸出。
3）生物因素。
在微生物之间，微生物与寄主动植物之间均存在着各种互相作用的关系，主要为寄生、共生、拮抗关系等。噬菌体与寄主菌、细菌素对某些细菌的KJ作用，就是生物因素的具体表现。
四、微生物代谢及其在生长检定中的意义
微生物生化鉴定试验，所使用的基本原理，就是利用微生物所物有的代谢反应，其中大部分波及到酶的反应
1） 微生物主要代谢内容
A、 呼吸作用-根据微生物呼吸作用Z终电子受体性质分为呼吸作用，无氧呼吸作用及发酵作用三种，无本质区别，都是物质被氧化，同时另一物质被还原只是物质被氧化分解程度和释放水平不同。
相关的生化鉴反应
如过氧化氢酶试验，硝酸盐还原试验，试验等。
B、 糖的分解
有关的生化鉴定反应
如糖（醇、苷）类发酵试验，葡萄糖的氧化/发酵试验，甲基试验，甲基红试验，VP试验
C、 蛋白质和氨基酸的分解
相关生化鉴定试验
如吲哚试验、明胶液化试验、硫化氢试验等。
（2）、微生物酶
酶是由细胞产生的特殊蛋白质或特殊蛋白质复合物，并能催化各种生物化学反应的有机催化剂，与一般无机催化剂相比，酶能在常温压下进行催化，有催化效率高和高度专一性的特点。
有关的生化鉴定反应
如糖代谢试验中的B-半乳糖苷酶试验（ONPG试验）蛋白质和氨基酸的代谢中的氨基酸试验等。
二、药品中常见几种微生物的介绍
1、 细菌一般知识
细菌形态多样，个体较小，一般的1~10UM
细菌细胞结构：粘液层和夹膜-血清学分理
细胞壁(cell wall)(cell wall)-革兰氏染色
细胞膜-生化鉴别（蛋白质分解）
细胞质
核质-DNA
附属器官（鞭毛、菌毛、芽孢）--识别、签定细菌种类重要特征
细菌生长变化过程：1、诱导期2、对数生长期3、稳定期4、死亡期
细菌的群体形态：1、菌落2、菌苔3、液体培养物质形态
细菌在液体培养基内的生长现象，基本上分为混浊、菌膜、沉淀三种。以药品中检验的细菌为例，大肠埃希氏杆菌、沙门菌、志贺菌均为混浊生长；铜绿假单胞菌为专性需氧菌，在培养基表面可形成菌膜，膜下混浊，越往下菌越少；金黄色葡萄球菌也为均匀混浊生长，但有部分细菌可沉淀于管认底。
细菌菌种的鉴定方法：1、菌种纯化2、鉴定的基本肉容
2、 霉菌的一般知识
1、 霉菌属于直菌，示指专营腐生或寄生生活的一群微小的丝状真菌，属真菌的一部分大多数霉菌属于无子实体的丝状真菌，具分枝的菌丝交织或菌丝体。一部分菌丝可产生孢子进行繁殖产生子孙，一部分则吸取营养称营养菌丝。霉菌菌落不是群体，一般为个体，由一个孢子萌发，生长而形成的菌丝支织而成为菌丝体
2、 药品常见的霉菌属1）根霉属2）毛霉属3）犁头霉属4）基他
3、 酵母菌一般知识
1、 酵母菌多数为单细胞，一般呈卯圆形、圆形或圆柱形，常有芽体相连为真核细胞、有完整的细胞结构，具细胞壁(cell wall)(cell wall)、细胞膜、细胞质、细胞核及细胞器
2、 常见的酵母菌属有1、酵母菌属，一般在液体培养时不产生菌酵，在长期培养后有的能生成菌酵2、裂殖酵母菌层，但薄而光滑，发酵产物主要为乙醇二氧化碳3、基它（汉逊氏酵母属，德巴利氏酵母属等）
4、在玫瑰红钠琼脂平板上的形态特征；多为圆形微凸，边缘整齐，表面光滑显润，内层生长为圆形，铁饼形，纺锤形或三角形，有酒香味，它与霉菌极易区别，但若出现粘质如油香味，它与霉菌极易区别，但若出现粘质如油状细菌菌落时，两者较难区别，Z可靠鉴别方法是显微镜检查，酵母菌个体比细菌大，绝大多数为出芽繁殖。
（未完持续）
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