要看楼主你所有的仪器和IEF strip的要求吧?我用过的是这家公司的GE Healthcare。他们的蛋白质浓度要求就写在使用手册里面。
http://www.gelifesciences.com/aptrix/upp01077.nsf/Content/2d_electrophoresis~2delectrophoresis_handbook
一般来说浓度高些没关系,上样时反正会加缓冲液。上样是根据蛋白质总量来上的,所以浓度太低时,仪器又限制了上样总容积,会加不上去足够的蛋白质量,Z后胶拿出来染色,蛋白质点淡得看不见,拿去测序就更没戏了。
2D步骤很多,需要优化,楼主如果没有足够的厂商技术支持或者前辈带着,自己慢慢摸索有得你受的。