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不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳——蛋白质的分离

lawyerzhaohy 2016-12-01
如题,Z好是实验报告还有思考题,希望帮助解答全部1.聚丙烯酰胺凝胶电泳,存在几种物理效应?2.系统的不连续性表现在哪些方面?3.在不连续体系SDS-PAGE中,当分离胶加完后, 需在其上加一层水, 为什么?         4.... 如题,Z好是实验报告还有思考题,希望帮助解答全部1.聚丙烯酰胺凝胶电泳,存在几种物理效应?2.系统的不连续性表现在哪些方面?3.在不连续体系SDS-PAGE中,当分离胶加完后, 需在其上加一层水, 为什么?         4. 在不连续体系SDS-PAGE中, 分离胶与浓缩胶中均含有TEMED和APS, 试述其作用?5. 样品液为何在加样前需在沸水中加热几分钟?6. 电极缓冲液中甘氨酸的作用?                                                                               
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jscuan123
1.聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)根据其有无浓缩效应,分为连续系统和不连续系统两大类,连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同,带电颗粒在电场作用下,主要靠电荷和分子筛效应。不连续系统中由于缓冲液离子成分,pH,凝胶浓度及电位梯度的不连续性,带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应,分子筛效应,还具有浓缩效应,因而其分离条带清晰度及分辨率均较前者佳。
2.不连续系统中由于缓冲液离子成分,pH,凝胶浓度及电位梯度的不连续性。
3隔离空气,形成平整的界面。
4凝胶配制过程要迅速, 催化剂TEMED要在注胶前再加入,否则凝结无法注胶.注胶过程Z好一次性完成,避免产生气泡.
5沸水中加热3分钟,去掉亚稳态聚合。
7 0 2016-12-02 0条评论 回复
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