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怎样从动物病料中将病毒的DNA提取出来

庆幸呀 2015-10-25
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碳噫9勺
以下是从动物病毒中快速提取DNA的方法,请参考
该方案采用离心操作,适合于从动物组织样品中快速提取病毒基因组DNA。以下步骤都在室温下进行。
1. 取50-100mg的动物组织加入约3倍体积的生理盐水进行匀浆,充分匀浆后10,000rpm离心2min去除残余组织。
2. 取150 μl上清液至新的洁净离心管中。
3. 加入500 μl DNA提取液至上清液中,颠倒混匀,室温静置5-10min裂解病毒。
4. 把DNA吸附柱装在2ml收集管中,把裂解后的液体全部转移至DNA吸附柱中,10,000 rpm离心1 min。
5. 倒弃滤液,把DNA吸附柱装回收集管中,加入400 μl洗涤液至DNA吸附柱中,10,000 rpm离心1 min。
注:洗涤液初次使用前请先加入48 ml无水乙醇。使用完立即盖上盖,以防乙醇挥发。
6. 重复步骤5。
7. 倒弃收集管中的滤液,把DNA吸附柱装回收集管中,10,000 rpm离心3 min。
8. 把DNA吸附柱装在新的洁净离心管中,加入30-50 μl洗脱液至吸附柱ZY,静置1-2min,10,000 rpm离心1min,所得即为DNA溶液,可用于后续实验,若暂时不用,应于-20 ℃可储存。
2 0 2017-03-07 0条评论 回复
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