用氨基酸自动分析仪测定氨基酸时前处理为什么加苯酚3,4滴
测定样品中各种游离氨基酸含量,可以除去脂肪杂质后,直接上柱进行分析。
测定蛋白质的氨基酸组成时样品必须经酸水解,使蛋白质完全变成氨基酸后才上柱进行分析。 经过处理后的样品上柱进行分析。上柱的样品量根据所用自动分析仪的灵敏度来确定。一般为每种氨基酸0.1μmol 左右(水解样品干重为0.3mg 左右)。测定必须在pH5~5.5、100℃下进行,反应进行时间为10~15min,生成的紫色物质在570nm 波长下进行比色测定。而生成的黄色化合物在440nm 波长下进行比色测定。做一个氨基酸全分析一般只需1h 左右,同时可将几十个样品一起装入仪器,自动按序分析,Z后自动计算给出精确的数据。仪器精确度在±1~3%。