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PCR产物纯化时 用的是什么纯化,扩增完直接纯,还是要跑胶?

BL狂人 2011-11-23
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goolring
那要看你的PCR产物有没有非特异性带,如果你PCR产物跑胶后很纯的只有一条带(不算引物二聚体),那么就不需要切胶纯化,传统法就是将PCR产物加入2倍体积的乙醇-20度沉淀过夜后低速短暂离心(如 3000rpm离心1~2min),弃掉上清,然后用70%乙醇洗涤一次后,弃掉乙醇,放干后再用无菌水或者TE溶解。当然这种方法对PCR产物纯化后回收率是很低的,你需要多做几管PCR,然后一起纯化回收。所以你Z好去买PCR产物纯化试剂盒,这个方法现在只是没有试剂盒的情况下应急的。如果是PCR产物跑胶后有两条以上的带,那么你就得切胶回收目的片段,推荐这个时候还是买切胶回收试剂盒,传统法不是没有,但现在用的太少。如果有兴趣了解,欢迎追问。 但无论哪种情况,纯化前后都需要跑电泳的。
15 0 2011-11-24 0条评论 回复
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