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酶标仪基本知识及其检测原理

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酶标仪基本知识及其检测原理

酶标仪基本知识及其检测原理,文章简要介绍了酶标仪的原理和及应用。

光是电磁波,波长100nm-400nm称为紫外光,400nm-780nm之间的光可被人眼观察到

,大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物

体上反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标

仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。

酶标仪检测单位:

酶标仪光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下

,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 

酶标仪检测单位用OD值表,OD是opticaldelnsity(光密度)的缩写,表示被检

测物吸收掉的光密度,OD=10g(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bo

uger-amberT-beer法则,OD值与光强度下述系:

E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表被吸收的光密度,Ⅰ0为在检测物之前的光强度,Ⅰ为从

被检测物出来的光强度。

OD值由下述公式计算:

E=OD=C×D×E

其中:C为检测物的浓度;D为检测物的厚度;E为摩尔子。

在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收Z

多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造检测结果的不准确。此,在测定

检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。

但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收

,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸

收Z小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。

酶标仪检测值计算

酶标仪中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,Zda为40

95.酶标仪定义没有光源下的透光值为0%,没有检测物的透光值为1**%。则实际检

测中,检测物的透光值均在0%一1**%之间。

酶标仪透光值的计算如下:

T=(Meas-Min)/(Max-Min)

其中T为透光值,Meas为检测的二进位数值,Min为在0%的情下检测的二进位数值

,Max为在1**%的情况下检测的二进位数值,举例如下:

酶标仪的ZX定位

酶标仪会自动对酶标仪酶标孔进行ZX定位,ZX定位是要消除酶标仪酶标孔底的

凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实

要进行35个点的测量,选取Z中间的5个点的均值为本孔的OD值。

酶标仪光源的参照通道

参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。

酶标仪的用途和其它提示

酶标仪用于ELISA试剂的测定,广泛用于各种实验室,包括临床实验室。

酶标仪质量控制

酶标仪质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。

酶标仪空白校正

有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气,其它大多数空白孔的设置是用试剂来

设置的,请按照试剂盒的说明书要求进行。

酶标仪检测结果的解释

由于有相当多的因素会影响检测的结果,如不同的酶标仪酶标板,检测试剂的体积

,都会造成OD值的不,因此,只有使用同一酶标仪酶标板反应的试剂检测结果才能

比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。

联系方式:021-56311478 56311479 13761302471

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2004-07-14
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