光是电磁波。 100nm〜400nm的波长称为紫外光。人眼可以观察到400nm〜780nm之间的光,而780nm称为红外光。人们只能看到颜色,因为光线会撞击物体并被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色的,是因为它们吸收了红色的光谱。微孔板读取器测量的原理是检测特定波长下分析物的吸光度。
检测单位:
正面和背面之间的能量差是被检测物体吸收的能量。在特定波长下,相同检测对象的浓度与吸收的能量具有定量关系。
检测单位用OD值表示。 OD是光学灵敏度(opticaldelity)(光密度)的缩写,表示被检测物体吸收的光密度,OD = 1log(1 / trans),其中trans是被检测物体的透射率值。根据Bouger-amber T-beer规则,OD值与光强度具有以下关系:
E = OD = log1 / 0其中E表示吸收的光密度,IO是检测对象之前的光强度,而IL是来自检测对象的光强度。OD值通过以下公式计算:
E = OD = C×D×E
C是测试物质的浓度
D是测试对象的厚度
E是摩尔因子
在特定波长下,每种物质都有其特定波长。在此波长下,该物质可以吸收最多的光能。如果选择其他波段,检测结果将不准确。因此,在测量检测对象时,我们选择要检测的特定波长,称为测量波长。
但是每种物质仍然具有一定的非特异性吸收光能。为了消除这种非特异性吸收,我们选择了一个参考波长以消除这种误差。在参考波长处,检测对象的光吸收*小。检测波长和参考波长处的吸光度之间的差异可以消除非特异性吸收。
Anthos酶标仪的检测值计算
仪器中的检测器接收通过被检测物体传输的光能,并将其转换为ZD为4095的二进制数字信号。仪器将不带光源的光透射率值定义为0%,并且无检测物的透光率值为100%。在实际测试中,被测物体的透光率在0%至100%之间。透光值计算如下:
T =(最小-测量值)/(ZD-最小测量值)
其中,T是透光值,Meas是检测到的二进制值,Min是在0%的条件下检测到的二进制值,Max是在100%的条件下检测到的二进制值,例如,如下所示:
MaX = 3600 Mn = 20Meas = 30
T =(30-20)/ 3600-20)= 0.0028
OD = 1og(1 / T)= 1og(1 / 0.0028)= 2.552
Anthos酶标仪的ZX位置
仪器将自动使微量滴定板孔居中。ZX定位是为了消除由于微量滴定板孔底部不均匀而引起的厚度不均匀,并导致检测不准确。测试每个酶标仪时,仪器实际上需要测量35个点,并且将*中间的5个点的平均值选择为孔的OD值。
光源的参考通道
参考通道用于校准由电压不稳定或灯泡磨损引起的影响。
使用酶标仪和其他提示用于ELISA试剂的测定,并广泛用于包括临床实验室在内的各种实验室。
质量控制
质量控制是试剂测试中的重要因素。请按照试剂说明的要求进行质量控制。
空白校正
有些套件说空白孔设置为空气,而其他大多数空白孔设置为试剂。请按照套件的说明进行操作。
测试结果的解释
因为有很多因素会影响测试结果,例如不同的ELISA板和测试试剂的体积,它们都会导致不同的OD值。因此,只能比较和比较使用相同ELISA板的试剂的测试结果。分析。对于结果的临床解释,请遵循试剂盒的说明。
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