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BioGems重组人胰岛素和转铁蛋白—细胞无血清培养添加

深度解析

BioGems无血清细胞培养添加物转铁蛋白和胰岛素

白蛋白、胰岛素和转铁蛋白等是无血清培养体系中细胞生长所必须的因子。

Biogems的人重组转铁蛋白和胰岛素生物活性与天然蛋白相同,批间稳定。这些蛋白由真核细胞重组表达,不含动物成分。质控严格,Zda程度地降低了污染的风险。

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PeproTech/

BioGems

10-366-1g

RecombinantHumanTransferrin

重组人转铁蛋白

水稻

1g/支

4900元

PeproTech/

BioGems

10-365-1g

RecombinantHumanInsulin

重组人胰岛素

毕赤酵母

1g/支

7000元

选购背景

一胰岛素和转铁蛋白在无血清培养中的作用

二重组和提取的胰岛素和转铁蛋白的区别

三胰岛素和转铁蛋白在无血清培养基中的使用浓度

一胰岛素和转铁蛋白在无血清培养中的作用

胰岛素在无血清培养基中的作用

无血清或低血清培养基中,胰岛素为必加组分,这是由胰岛素对细胞的重要作用决定的。

我们都知道,胰岛素在体内Z主要的功能是调节机体血糖水平。其实胰岛素的作用非常

广泛,包括调节蛋白质和脂肪的代谢,以及促进细胞生长等。

转铁蛋白在无血清培养基中的作用

转铁蛋白是通用的铁转运剂,其可通过帮助细胞调节对铁的摄取量而维持细胞的稳态,

进而有利于细胞的生长和增殖。

牛血清中含有牛种属的转铁蛋白,由于转铁蛋白的保守性,牛转铁蛋白可对人和动物

细胞起到很好地保护和支持作用,因此培养基中通常要加入牛血清从而组成完全培养基。无

血清培养基为达到与含血清培养基相同或相似的细胞培养性能,其中也必须添加转铁蛋白,

以实现对细胞铁离子平衡的调节,以及对细胞生长和增殖的维持。

二无血清培养基中应该添加提取的胰岛素和转铁蛋白,还是重组的胰岛素和转铁蛋白?

人胰岛素的来源有限,无法满足临床和科研的需求,因此人们通常从牛或猪的胰脏中提取获得胰岛素。

人血浆中转铁蛋白的含量丰富,约为25mg/ml,占血浆总蛋白的4%,而且转铁蛋白的种属间交叉活性比较强,所以转铁蛋白多从人或牛的血浆中提取而得。

胰岛素种属间高度保守,猪和牛的胰岛素与人的胰岛素氨基酸序列上分别仅有1个和3

个氨基酸的差异,所以猪和牛的胰岛素完全可以替代人的胰岛素来进行科学实验和临床ZL。然而,毕竟猪和牛的胰岛素属异种蛋白,进入人体后容易产生抗体,影响治LX果,并引起副反应。所以,目前临床上广泛应用的是重组人胰岛素,即使用基因工程手段,将人的胰岛素基因转移到细菌或者酵母细胞中,然后利用发酵工艺,进行大规模的生产,从而得到大量、高纯度的人胰岛素。

同样的,提取的转铁蛋白具有安全性差和批间差大等缺陷。尤其是将提取的转铁蛋白添加于用于细胞ZL的无血清培养基中时,可能会将人或动物的病原体(如疯牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原体)藉回输人体的细胞而带入人体,从而发生非预期的疾病。而重组的转铁蛋白,则可完全避免人或动物病原体污染的可能性,因此更适合用于配制细胞ZL用的无血清培养基。

三胰岛素和转铁蛋白在无血清培养基中的使用浓度

胰岛素

所培养的细胞不同,无血清培养基中所需的胰岛素量也有所区别,一般在1-10mg/L之间。

转铁蛋白在无血清培养基中的使用浓度

转铁蛋白

同样的,细胞种类不同,对转铁蛋白的需求量也不同,下表谨供参考。具体的浓度还是要根据细胞的种类、状态和想要实现的功能来通过实验确定。

表4:转铁蛋白在无血清细胞培养基中的添加浓度

原代细胞

CHO(ZG仓鼠卵巢细胞)

杂交瘤和Vero细胞

转铁蛋白工作浓度

5-100mg/L

10-50mg/L

5mg-20mg/L

资料来源:BioGems

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2004-08-19
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