在日常分离分析工作中，色谱柱的正确用于和维护十分重要，色谱柱用于的操作，直接影响的用于寿命，稍有不妥就会降低柱效、缩短用于寿命甚至损坏。 在操作过程中，需要注意下列问题： (1)在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。 (2)如果仪器用来做常规分析，样本种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。 (3)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢运行，在阀进样时阀的转动不能过缓。 (4)应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。 (5)如用于柱温控制装置时，应注意在通人流动相后才能升温。 (6)一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可反冲时，才可反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。 (7)避免将基质复杂的样本尤其是生物样本直接注人柱内，需要对样本运行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可而且应该经常更换。 (8)经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在运行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50-75mL。 (9)保存时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。 (10)用于过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出运行清洗;另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大 (11)在完成分离分析工作之后，不应立即停机，需及时对色谱分析系统运行冲洗，一般0.5h以上，以除去色谱柱内的杂质。 (12)分析选择用于适宜的流动相，以避免固定相被破坏。有时可在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
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2004-08-03
