ELISA检测抗体方法中,包被抗原后封闭前洗板,封闭后加一抗前洗板,封闭前洗板,因为包被液同封闭液的成分不同,pH也可能不一样,有必要将孔板洗净。
加一抗前要不要洗板,要看情况。一般的ELISA实验中封闭液同时也是一抗稀释液,这时就没必要洗板了。但是如果一抗稀释液同封闭液成分不同,则应该洗板,去除封闭液的游离成分。
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。
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