ELISA是主要的筛选方法。建立ELISA方法的主要注意事项有:①平板的选择,包括批间差异和储存条件(用标准阳性血清筛选不同厂家的平板);②检测温度通常推荐4~C;③血清孵育至少4hr;④洗涤液不能含有Tween20。Tween20是一种去垢剂,神经节糖苷可溶于去垢剂,因而可溶解洗去吸附在聚苯乙烯板上的神经节糖苷。2%的牛血清白蛋白(BSA)是较佳的封闭剂,若受检血清含抗BSA抗体时,可用人血清白蛋白代替。每个实验室都必须建立自己的正常值参考范围,因为与其他许多自身抗体一样,抗神经节糖苷抗体和抗糖脂抗体在正常和疾病控制期的血清中呈低滴度。在每个试验板上需采用OD值已知的血清作为阳性对照和质量控制。近年也有商品试剂盒出售,但未标准化。
薄层色谱分析(TLC)技术为检测的金标准。尽管不适宜滴度定量,但可鉴定特定的糖脂抗原,建议采用ELISA法检测,用TLC进行验证。
在一些特别亚型的外周神经疾病诊断中,抗神经节苷脂抗体的检测并不十分必要,因为排除其他发病因素,通过一些单一的试验,主要是电刺激诊断试验中特征性图像就可明确诊断。抗神经节苷脂抗体的检测可用于:①确证诊断,如多点运动神经元疾病(MMN)或Miller-Fisher综合征(MFS);②对已诊断疾病进行亚类分析,如将IgM副蛋白血症性神经病分为抗NeuAe-(α28)NeuAc活性或抗SGPG活性;③鉴别和排除诊断,如肉毒中毒、脑干脱髓鞘病变和MFS。
抗神经节苷脂抗体与数种临床综合征特异性相关。副蛋白血症神经疾病综合征是伴有共济失调的慢性粗纤维感觉神经疾病。IgM副蛋白与带NeuNAC(α28)NeuAC相连的二唾液酸的神经节苷脂反应,包括GD3,GDlb,GTla、GTlb和GQlb等。IgM副蛋白可与人红细胞上的唾液酸化糖蛋白表位发生交叉反应,因此患者可伴有冷凝集疾病。MFS是一种急性自限性变异性GBS,症状包括共济失调、反射消失、眼肌麻痹,在90%以上的患者有抗GQlb和抗GTla抗体,约一半病例含有抗GDlb和(或)GD3抗体。初期发病患者,血清抗体水平可达到Zgao滴度,随着临床症状的缓解而消失。临床综合征主要是伴有眼肌麻痹、感觉神经病变,IgG抗体短暂升高,与急性缓解有关;而IgM副蛋白持续升高,与MFS的慢性状态有关。
伴脱髓鞘神经传导阻滞的多点运动神经元疾病(MMN)患者中,约有50%存在抗GMl神经节苷脂抗体。抗GMl抗体阳性的MMN患者多为男性,临床症状包括慢性不对称性运动神经元综合征,好发于上肢远侧端。慢性炎症脱髓鞘多神经元疾病(CIDP)中,20%的患者可存在抗GMl抗体。约50%GBS患者可出现多种抗神经节苷脂和抗糖脂抗体,但抗GMl抗体在GBS中的意义仍不清楚。
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