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肿瘤细胞检测的方法

深度解析

肿瘤细胞检测的方法:
使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。而荧光定量PCR的方法相应的可分为特异类和非特异类两类,特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物;而非特异性检测方法是在在PCR反应体系中,加入过量荧光染料,荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射出荧光信号。前者由于增加了探针的识别步骤,特异性更高,但后者则简便易行。
荧光定量PCRZ常用的方法是DNA结合染料SYBRGreenⅠ的非特异性方法和Taqman水解探针的特异性方法,在这里主要介绍这2种方法,其它方法请参考其它荧光定量PCR资料。
1、非特异性SYBRGreenI染料法
SYBRGreenI是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料(结合示意图),在游离状态下,SYBRGreenI发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强(作用机理图)。因此,SYBRGreenI的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。
2、特异性Taqman水解探针法
Taqman荧光定量技术是以Taqman荧光探针为基础,Taqman荧光探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个荧光发射基团和一个荧光淬灭基团。探针完整时,发射基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;
PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使荧光发射基团和荧光淬灭基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。从而实现定量(如下图)。常用的荧光基团是FAM,TET,VIC,HEX。
肿瘤细胞GalCβ-半乳糖苷酶比色检测试剂盒50tests/53mmplate
LDHLDH细胞毒性检测试剂盒500tests/96wellplate
TUNELTUNEL色标法细胞凋亡检测试剂盒50tests/96wellplate
NO一氧化氮色标法检测试剂盒250tests/96wellplate
pNPP硝基苯磷酸钠(pNPP)磷酸酶检测试剂盒500tests/96wellplate
MGmP孔雀绿磷酸盐检测试剂盒2500tests/96wellplate
CCA比色法钙分析试剂盒250tests/96wellplate
CSK活/死细胞染色试剂盒1000tests/96wellplate
GAPDH比色法GAPDH分析试剂盒1000tests/96wellplate
IVTFA体外管腔形成分析试剂盒50tests/96wellplate
TACA总抗氧化能力检测试剂盒100tests
C3DGK胶原I-3D凝胶试剂盒100mg
CCCSCK
SOD超氧化物歧化酶分析试剂盒100tests
MYCO支原体PCR检测试剂盒100tests
CAT过氧化氢酶活性分析试剂盒100tests
CAS细胞凋亡蛋白酶-3分析试剂盒100tests
GPX谷胱甘肽过氧化物酶分析试剂盒100tests
EndoFectagen内皮细胞转染试剂盒250Transfections
FibroFectagen成纤维细胞转染试剂盒200Transfections
EpiFectagen上皮细胞转染试剂盒100Transfections
MesenFectagen间充质干细胞转染试剂盒250Transfections
AstroFectagen星形细胞转染试剂盒250Transfections
KeratoFectagen角质细胞转染试剂盒200Transfections
SMCFectagen平滑肌细胞转染试剂盒250Transfections
NeuroFectagen神经细胞转染试剂盒200Transfections
MelanoFectagen黑色素细胞转染试剂盒200Transfections
HBMECL人脑微血管内皮细胞裂解物200g
HBVSMCL人脑血管平滑肌细胞裂解物200g
HBVCL人脑血管周细胞裂解物200g
HCPECL人脉络丛内皮细胞裂解物200g
HCPEpiCL人脉络丛上皮细胞裂解物200g
HCPFL人脉络丛成纤维细胞裂解物200g
HMCL人脑膜细胞裂解物200g
HNL人神经细胞裂解物200g
HCGCL人小脑颗粒细胞裂解物200g
HN-hL人海马趾神经细胞裂解物200g
HOPCL人少突胶质前体细胞裂解物200g
HOPC-osL人少突胶质前体细胞-悬浮生长裂解物200g
HSCL人雪旺细胞裂解物200g
HPCL人神经束膜细胞裂解物200g
HAL人星形胶质细胞裂解物200g
HA-cL人小脑星形胶质细胞裂解物200g
HA-spL人脊髓星形胶质细胞裂解物200g
HA-hL人海马趾星形胶质细胞裂解物200g
HML人小胶质细胞裂解物200g
HDMECL人微血管内皮细胞裂解物200g
HDLECL人淋巴内皮细胞裂解物200g
HEKL人表皮角质细胞裂解物200g
HEK-aL人表皮角质细胞-成人裂解物200g
HELM-lL人表皮黑色素细胞-浅色素裂解物200g
HELM-mL人表皮黑色素细胞-中色素裂解物200g
HELM-dL人表皮黑色素细胞-深色素裂解物200g
HDF-fL人成纤维细胞-胎儿裂解物200g
HDF-nL人成纤维细胞-新生儿裂解物200g
HDF-aL人成纤维细胞-成人裂解物200g
HHDPCL人毛乳头细胞裂解物200g
HHGMCL人SF基质细胞裂解物200g
HHORSCL人毛囊外根壳细胞裂解物200g
HHIRSCL人毛囊内根壳细胞裂解物200g
HLECL人淋巴内皮细胞裂解物200g肿瘤细胞


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2005-02-23
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