肿瘤细胞实验条件

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肿瘤细胞实验条件
1)固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗体(或抗原)的选择：将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的Z适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值Zda而蛋白量Z少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。
(3)酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接大鼠ELISA试剂盒法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4)酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。
肿瘤细胞HStRNA人滑膜细胞总RNA10g
HNPCtRNA人髓核细胞总RNA10g
HHSECtRNA人肝窦内皮细胞总RNA10g
HIBEpiCtRNA人肝内胆管上皮细胞总RNA10g
HHtRNA人肝细胞总RNA10g
HHSteCtRNA人肝脏星形细胞总RNA10g
HCMECtRNA人心脏微血管内皮细胞总RNA10g
HAECtRNA人主动脉内皮细胞总RNA10g
HASMCtRNA人主动脉平滑肌细胞总RNA10g
HCMtRNA人心肌细胞总RNA10g
HCM-atRNA人心肌细胞-成人总RNA10g
HCFtRNA人心脏成纤维细胞总RNA10g
HCF-avtRNA人心肌细胞-成人心室总RNA10g
HCF-aatRNA人心肌细胞-成人心房总RNA10g
HCEpiCtRNA人角膜上皮细胞总RNA10g
HKtRNA人角膜细胞总RNA10g
HRPEpiCtRNA人视网膜色素上皮细胞总RNA10g
HLEpiCtRNA人晶状体上皮细胞总RNA10g
HIPEpiCtRNA人虹膜色素上皮细胞总RNA10g
HConFtRNA人结膜成纤维细胞总RNA10g
HNPCEpiCtRNA人无色素睫状上皮细胞总RNA10g
HTMCtRNA人小梁网细胞总RNA10g
HAmEpiCtRNA人羊膜上皮细胞总RNA10g
HVTtRNA人滋养层绒毛细胞总RNA10g
HVMFtRNA人绒毛间叶成纤维细胞总RNA10g
HPA-vtRNA人前脂肪细胞-内脏总RNA10g
HPA-stRNA人前脂肪细胞-皮下总RNA10g
HMSC-bmtRNA人间充质干细胞-总RNA10g
HMSC-adtRNA人间充质干细胞-脂肪总RNA10g
HMSC-hptRNA人间充质干细胞-肝脏总RNA10g
HUMSCtRNA人脐带间充质干细胞总RNA10g肿瘤细胞

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2005-02-23