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培养基的配制与灭菌技术

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培养基是将微生物生长繁殖所需要的各种营养物质,用人工的方法配制而成的用于培养微生物的营养基质。培养基种类很多,不同的微生物所需培养基不同。就培养基中营养物质的来源可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。按培养基特殊用途可分加富培养基,选择培养基、鉴别培养基。按培养基制成后的物理状态可分为固体培养基,液体培养基和半固体培养基。固体培养基是在液体培养基中加入1.5%-2.0%琼脂作凝固剂;半固体培养基则加入0.5%-0.8%的琼脂。

一般培养基除含有大量水分外,还含有碳素、氮素、无机盐类和维生素等。此外,由于徽生物生长繁殖必须在Z适的酸碱度范围内,才能表现出Zda的生命活力,因此应根据不同种类的徽生物.将培养基调节到一定的pH值范围。
  培养基配制后还必须进行灭菌,灭菌是指杀死或消灭所有微生物,包括营养体、孢子和芽孢。灭菌的方法很多,可分为物理方法与化学方法两大类。物理方法包括湿热灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌、过滤CJ等;化学方法主要是利用化学药品对接种室空间、用具和其它物体表面进行灭菌与消毒。消毒一般是指消灭有害微生物的营养体和病原菌。

(一)培养基的配制方法

l.按照配方的组分及用量先分别称量并配成液体;
2.根据要求调到一定的酸碱度(pH值);
3.若要制成固体则加入2%琼脂并加热融化;
4.根据需要的数量分装入试管或三角瓶中,加上棉塞或盖上纱布;

5.包扎好灭菌后备用。

(二)培养基及常用器皿的灭菌
  培养微生物常用的玻璃器具主要有试管、三角瓶、培养皿、吸管等,在使用前必须先进行灭菌,使容器中不含任何杂菌;培养微生物用的营养基质(培养基),在接入纯种前也必须先行灭菌,使培养基呈无菌状态。培养基可分装入器皿中一起灭菌,也可在单独灭菌后以无菌操作分装入无菌的器皿中。

注:1.棉塞制作与器皿包扎。

2.培养基与器皿的高压蒸汽灭菌。

3.玻璃器皿的干热灭菌。


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2005-01-31
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