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1.使用前的检查
液氮罐在充填液氮之前，首先要检查外壳有无凹陷，真空排气口是否完好。若被碰坏，真空度则会降低，严重时进气不能保温，这样罐上部会结霜，液氮损耗大，失去继续使用的价值。其次，检查罐的内部，若有异物，必须取出，以防内胆被腐蚀。
2.液氮的充填
液氮罐内液氮的贮存使用液氮罐长期贮存物品时，要注意及时补充液氮。填充液氮时要小心谨慎。对于新罐或处于干燥状态的罐一定要缓慢填充并进行预冷，以防降温太快损坏内胆，减少使用年限。充填液氮时不要将液氮倒在真空排气口上，以免造成真空度下降。盖塞是用绝热材料制造的，既能防止液氮蒸发，也能起到固定提筒的作用，所以开关时要尽量减少磨损，以延长使用寿命。液氮液面以不低于冷藏物品为宜。检查液氮贮存量时，可使用称重法或手电筒照射法，亦可用细木、竹竿插入液氮罐中视其结霜高度(等于液面高度)的方法。但切勿用空心管插入，以免液氮从管内冲出飞溅伤人。
3.使用过程中的检查
使用过程中要经常检查。可以用眼观测也可以用手触摸外壳，若发现外表挂霜，应停止使用;特别是颈管内壁附霜结冰时不宜用小刀去刮，以防颈管内壁受到破坏，造成真空不良，而是应将液氮取出，让其自然融化。
4.液氮罐的放置
液氮罐要存放在通风良好的阴凉处，不要在太阳光下直晒。由于其制造精密及其固有特性，无论在使用或存放时，液氮罐均不准倾斜、横放、倒置、堆压、相互撞击或与其他物件碰撞，要做到轻拿轻放并始终保持直立。
5.液氮罐的清洗
一般液氮罐使用一年后，要清洗消毒一次。清洗时要先用中性洗涤剂洗刷，再用不高于40℃的温水冲洗干净，将水排净，用鼓风机吹干，待内胆充分干燥后，才可再充装液氮。液氮罐内的液氮挥发完后，所剩遗漏物质(如冷冻精子)很快融化，变成液态物质而附在内胆上，会对铝合金的内胆造成腐蚀，若形成空洞，液氮罐就会报废，因此液氮罐内液氮耗尽后对罐子进行刷洗是十分必要的。具体的刷洗办法如下：首先把液氮罐内提筒取出，液氮移出，放置23天，待罐内温度上升到0℃左右，再倒人30℃左右的温水，用布擦洗。若发现个别融化物质粘在内胆底上，一定要细心洗刷干净。然后再用清水冲洗数次，之后倒置液氮罐，放在室内安全不宜翻倒处，自然风干，或如前所述用鼓风机风干。注意在整个刷洗过程中，动作要轻慢，倒人水的温度不可超过40℃，总重不要超过2kg为宜。
6.液氮罐的安全运输
液氮罐在运输过程中必须装在木架内垫好软垫，并固定好。罐与罐之间要用填充物隔开，防止颠簸撞击，严防倾倒。装卸车时要严防液氮罐碰击，更不能在地上随意拖拉，以免减少液氮罐的使用寿命。
注意事项:
1)液氮是低温制品，在使用过程中要防止冻伤
2)在液氮中操作及存取冷冻物品时速度要快，要注意轻拿轻放，以免内容物解冻，造成不必要的损失。
3)在使用和贮存液氮的房间内，要保持通风良好，以避免空间缺氧，造成窒息。
4)由于液氮不具杀菌性，故接触液氮的用具要注意消毒。
5)液氮罐在运输过程中一定要固定好，以防震动和倒翻。
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